La NEM es un aceptor en la reacción de Michael, es decir, añade nucleófilos como los tioles. El tioéter resultante presenta un enlace C-S muy fuerte y la reacción es virtualmente irreversible. La reacción con los tioles se da en el rango de pH entre 6,5 y 7,5. A un pH más alcalino, la NEM puede reaccionar con aminas o experimentar hidrólisis. En la enzimología, la NEM sirve para probar la funcionalidad de los grupos tiol. Es un inhibidor irreversible de todas las cisteína peptidasas mediante la alquilación del grupo tiol del sitio activo.[3][4]
Mecanismo de inhibición irreversible de una cisteína peptidasa con NEM.
Usos
La NEM bloquea el transporte vesicular. En soluciones tampones de lisis se suele agregar NEM en una concentración 20-25 mM para inhibir la desumolización de proteínas en los análisis inmunoblot. la NEM también se ha utilizado como inhibidor de deubiquitinasas.
El grupo de Arthur Kornberg usó N-etilmaleimida para inactivar la polimerasa de ADN III con el fin de comparar su actividad con la de la polimerasa de ADN I. Este experimento demostró que la polimerasa III conforma la maquinaria de la replicación de ADN en las bacterias, y no la polimerasa I, como se pensaba hasta entonces.
La NEM contribuyó a la identificación molecular del cotransportador K-Cl (KCC) en las células embrionarias humanas.[5] Desde entonces, NEM ha servido como herramienta de diagnóstico para detectar la presencia del KCC en la membrana celular de numerosas especies en el reino animal.[6]
Referencias
Número CAS
Thiol reactive probes el 28 de enero de 2008 en Wayback Machine. at Invitrogen
Nelson, D. L.; Cox, M. M. "Lehninger, Principles of Biochemistry" 3rd Ed. Worth Publishing: New York, 2000.
Gregory, J. D. (1955) J. Am. Chem.
Forbush, B; Brill, S; Payne, JA (1996). «Molecular cloning and functional expression of the K-Cl cotransporter from rabbit, rat, and human. A new member of the cation-chloride cotransporter family». J. Biol. Chem.(en inglés)271: 16237-16244. doi:10.1074/jbc.271.27.16237.
Adragna, NC; Di Fulvio, M; Lauf, PK (2004). «Regulation of K-Cl cotransport: from function to genes». The Journal of Membrane Biology(en inglés)201: 109-137. doi:10.1007/s00232-004-0695-6.
Datos:Q292393
Enero 19, 2022
etilmaleimida, compuesto, orgánico, derivado, ácido, maleico, trata, alqueno, grupo, funcional, imida, reacciona, tioles, generalmente, para, modificar, residuos, cisteína, proteínas, péptidos, generalfórmula, estructuralfórmula, molecular, identificadoresnúme. La N etilmaleimida NEM es un compuesto organico derivado del acido maleico Se trata de un alqueno con un grupo funcional imida Reacciona con tioles y se usa generalmente para modificar residuos de cisteina en proteinas y peptidos 2 N etilmaleimidaGeneralFormula estructuralFormula molecular IdentificadoresNumero CAS128 53 0 1 ChEBI44485ChEMBLCHEMBL8211ChemSpider4209DrugBank02967PubChem4362UNIIO3C74ACM9VKEGGC02441InChIInChI InChI 1S C6H7NO2 c1 2 7 5 8 3 4 6 7 9 h3 4H 2H2 1H3 Key HDFGOPSGAURCEO UHFFFAOYSA NPropiedades fisicasMasa molar125 048 g mol editar datos en Wikidata Quimica organica EditarLa NEM es un aceptor en la reaccion de Michael es decir anade nucleofilos como los tioles El tioeter resultante presenta un enlace C S muy fuerte y la reaccion es virtualmente irreversible La reaccion con los tioles se da en el rango de pH entre 6 5 y 7 5 A un pH mas alcalino la NEM puede reaccionar con aminas o experimentar hidrolisis En la enzimologia la NEM sirve para probar la funcionalidad de los grupos tiol Es un inhibidor irreversible de todas las cisteina peptidasas mediante la alquilacion del grupo tiol del sitio activo 3 4 Mecanismo de inhibicion irreversible de una cisteina peptidasa con NEM Usos EditarLa NEM bloquea el transporte vesicular En soluciones tampones de lisis se suele agregar NEM en una concentracion 20 25 mM para inhibir la desumolizacion de proteinas en los analisis inmunoblot la NEM tambien se ha utilizado como inhibidor de deubiquitinasas El grupo de Arthur Kornberg uso N etilmaleimida para inactivar la polimerasa de ADN III con el fin de comparar su actividad con la de la polimerasa de ADN I Este experimento demostro que la polimerasa III conforma la maquinaria de la replicacion de ADN en las bacterias y no la polimerasa I como se pensaba hasta entonces La NEM contribuyo a la identificacion molecular del cotransportador K Cl KCC en las celulas embrionarias humanas 5 Desde entonces NEM ha servido como herramienta de diagnostico para detectar la presencia del KCC en la membrana celular de numerosas especies en el reino animal 6 Referencias Editar Numero CAS Thiol reactive probes Archivado el 28 de enero de 2008 en Wayback Machine at Invitrogen Nelson D L Cox M M Lehninger Principles of Biochemistry 3rd Ed Worth Publishing New York 2000 Gregory J D 1955 J Am Chem Forbush B Brill S Payne JA 1996 Molecular cloning and functional expression of the K Cl cotransporter from rabbit rat and human A new member of the cation chloride cotransporter family J Biol Chem en ingles 271 16237 16244 doi 10 1074 jbc 271 27 16237 Adragna NC Di Fulvio M Lauf PK 2004 Regulation of K Cl cotransport from function to genes The Journal of Membrane Biology en ingles 201 109 137 doi 10 1007 s00232 004 0695 6 Datos Q292393 Obtenido de https es wikipedia org w index php title N etilmaleimida amp oldid 119173076, wikipedia, wiki, leyendo, leer, libro, biblioteca,
