El reactivo isopropil-β-D-1-tiogalactopiranósido, o abreviadamente IPTG, es una molécula de uso común en investigación en biología molecular. Se usa como análogo no hidrolizable de la alolactosa para inducir la expresión génica en el laboratorio.
La alolactosa es un metabolitoisómero de la lactosa, que dispara la transcripción del operón de expresiónlac. A diferencia de la alolactosa, el átomo de azufre (S) en el IPTG crea un enlace covalente no hidrolizable por la bacteria, lo que evita que el IPTG sea degradado progresivamente tras su adición y mantiene así su concentración constante en el medio.
En experimentos de clonación, las colonias bacterianas que se han transformado con un plásmidorecombinante se pueden identificar usando un análogo de galactosa, el 5-bromo-4-cloro-3-indolil-β-D-galactopiranósido (abreviadamente X-gal). Este compuesto puede ser metabolizado por la β-galactosidasa en galactosa, un monosacárido, y 5-bromo-4-cloro-3-hidroxindol, un compuesto de color azul. Las células transformantes que han captado plásmidos con el operón lac intacto, una vez inducidas por IPTG, están expresando activamente β-galactosidasa, que hidroliza X-gal y colorea de azul sus colonias. Las colonias de células transformantes que han captado un plásmido con el operón lac recombinante, en cuyo interior se ha insertado el gen de la proteína de interés, sufren con la inserción la inactivación del gen lacZ (uno de los genes que codifica la β-galactosidasa) y por tanto, no pueden expresar β-galactosidasa ni degradar X-gal, permaneciendo sus colonias de color blanco.
Muchos elementos regulatorios del operón lac se utilizan de esta manera como sistemas inducibles de expresión de proteínas. IPTG es un inductor efectivo en un rango de concentraciones de 100 μM a 1,5 mM.
Referencias
Número CAS
Hansen LH, Knudsen S, Sørensen SJ (junio de 1998). . Curr. Microbiol.36 (6): 341-7. PMID 9608745. doi:10.1007/s002849900320. Archivado desde el original el 18 de octubre de 2000. Consultado el 30 de mayo de 2010.
isopropil, tiogalactopiranósido, reactivo, isopropil, tiogalactopiranósido, abreviadamente, iptg, molécula, común, investigación, biología, molecular, como, análogo, hidrolizable, alolactosa, para, inducir, expresión, génica, laboratorio, nombre, iupacgeneralf. El reactivo isopropil b D 1 tiogalactopiranosido o abreviadamente IPTG es una molecula de uso comun en investigacion en biologia molecular Se usa como analogo no hidrolizable de la alolactosa para inducir la expresion genica en el laboratorio Isopropil b D 1 tiogalactopiranosidoNombre IUPACIsopropil b D 1 tiogalactopiranosidoGeneralFormula estructuralFormula molecularC9H18O5S1IdentificadoresNumero CAS367 93 1 1 ChEBI61448ChemSpider571154DrugBank01862PubChem656894UNIIX73VV2246BInChIInChI InChI 1S C9H18O5S c1 4 2 15 9 8 13 7 12 6 11 5 3 10 14 9 h4 13H 3H2 1 2H3 t5 6 7 8 9 m1 s1 Key BPHPUYQFMNQIOC NXRLNHOXSA NPropiedades fisicasAparienciacristales blancosDensidad1370 kg m 1 37 g cm Masa molar238 31 g molPunto de fusion378 15 K 105 C Punto de ebullicion711 55 K 438 C Propiedades quimicasSolubilidad en aguasolublePeligrosidadPunto de inflamabilidad492 K 219 C Frases RR19 R40 R66Valores en el SI y en condiciones estandar 25 y 1 atm salvo que se indique lo contrario editar datos en Wikidata La alolactosa es un metabolito isomero de la lactosa que dispara la transcripcion del operon de expresion lac A diferencia de la alolactosa el atomo de azufre S en el IPTG crea un enlace covalente no hidrolizable por la bacteria lo que evita que el IPTG sea degradado progresivamente tras su adicion y mantiene asi su concentracion constante en el medio La molecula de IPTG es absorbida por la bacteria a traves de la accion de la enzima permeasa de lactosa 2 Una vez dentro de la celula induce la transcripcion del gen que codifica la b galactosidasa una enzima hidrolasa que cataliza la hidrolisis de b galactosidos a monosacaridos En experimentos de clonacion las colonias bacterianas que se han transformado con un plasmido recombinante se pueden identificar usando un analogo de galactosa el 5 bromo 4 cloro 3 indolil b D galactopiranosido abreviadamente X gal Este compuesto puede ser metabolizado por la b galactosidasa en galactosa un monosacarido y 5 bromo 4 cloro 3 hidroxindol un compuesto de color azul Las celulas transformantes que han captado plasmidos con el operon lac intacto una vez inducidas por IPTG estan expresando activamente b galactosidasa que hidroliza X gal y colorea de azul sus colonias Las colonias de celulas transformantes que han captado un plasmido con el operon lac recombinante en cuyo interior se ha insertado el gen de la proteina de interes sufren con la insercion la inactivacion del gen lacZ uno de los genes que codifica la b galactosidasa y por tanto no pueden expresar b galactosidasa ni degradar X gal permaneciendo sus colonias de color blanco Muchos elementos regulatorios del operon lac se utilizan de esta manera como sistemas inducibles de expresion de proteinas IPTG es un inductor efectivo en un rango de concentraciones de 100 mM a 1 5 mM Referencias Editar Numero CAS Hansen LH Knudsen S Sorensen SJ junio de 1998 The effect of the lacY gene on the induction of IPTG inducible promoters studied in Escherichia coli and Pseudomonas fluorescens Curr Microbiol 36 6 341 7 PMID 9608745 doi 10 1007 s002849900320 Archivado desde el original el 18 de octubre de 2000 Consultado el 30 de mayo de 2010 Vease tambien EditarX gal Datos Q419229 Obtenido de https es wikipedia org w index php title Isopropil b D 1 tiogalactopiranosido amp oldid 135198348, wikipedia, wiki, leyendo, leer, libro, biblioteca,
