La Inmunoprecipitación de cromatina (ChIP en inglés) es un método bioquímico usado para determinar los sitios de unión en el genoma de diversas proteínas in vivo, como histonas modificadas y también se emplea para estudiar la unión de factores de transcripción al ADN. Esta técnica consiste en el uso de un anticuerpo que reconozca la proteína de interés, no solamente en disolución sino también en la cromatina.[1]
Determinar la distribución de las modificaciones específicas de las histonas y sus variantes, así como la de otros componentes de la cromatina sobre secuencias específicas del ADN, proporciona información valiosa acerca de cómo funcionan estas proteínas y sus modificaciones, dentro del contexto de la cromatina. La estructura de la cromatina desempeña un papel fundamental en la función del ADN, regula procesos que se dan sobre la estructura del nucleosoma como la transcripción, la replicación y la recombinación.[cita requerida]
La técnica de Inmunoprecipitación de cromatina (ChIP) consta básicamente de dos pasos:
las células in vivo son tratadas con formaldehído para que se fijen las interacciones proteína-proteína y las interacciones proteína-ADN
las células son lisadas para fraccionar la cromatina unida a las proteínas
seguido de la inmunoprecipitación de los complejos proteína-ADN con anticuerpos específicos para la proteína de interés.
los fragmentos de ADN se separan de las proteínas mediante acidificación y se aíslan
Las secuencias específicas de ADN inmunoprecipitadas son entonces amplificadas por PCR para determinar si han sido o no enriquecidas en las muestras correspondientes para cada anticuerpo. [2] [1]
↑ Voet D., Voet J.G. (2006). «cap34:Control de la expresión». Bioquímica (tercera edición). Médica Panamericana. p. 1527. Consultado el 22 de febrero de 2020.
Kuo M.H., Allis C.D. (1999). «In vivo cross-linking and immunoprecipitation for studying dynamic Protein:DNA associations in a chromatin environment». Methods19 (3): 425-433.
Enlaces externos
Inmunoprecipitación de cromatina
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Datos:Q901026
Multimedia:Chromatin immunoprecipitation
Octubre 27, 2021
inmunoprecipitación, cromatina, este, artículo, sección, necesita, referencias, aparezcan, publicación, acreditada, este, aviso, puesto, abril, 2018, chip, inglés, método, bioquímico, usado, para, determinar, sitios, unión, genoma, diversas, proteínas, vivo, c. Este articulo o seccion necesita referencias que aparezcan en una publicacion acreditada Este aviso fue puesto el 9 de abril de 2018 La Inmunoprecipitacion de cromatina ChIP en ingles es un metodo bioquimico usado para determinar los sitios de union en el genoma de diversas proteinas in vivo como histonas modificadas y tambien se emplea para estudiar la union de factores de transcripcion al ADN Esta tecnica consiste en el uso de un anticuerpo que reconozca la proteina de interes no solamente en disolucion sino tambien en la cromatina 1 Determinar la distribucion de las modificaciones especificas de las histonas y sus variantes asi como la de otros componentes de la cromatina sobre secuencias especificas del ADN proporciona informacion valiosa acerca de como funcionan estas proteinas y sus modificaciones dentro del contexto de la cromatina La estructura de la cromatina desempena un papel fundamental en la funcion del ADN regula procesos que se dan sobre la estructura del nucleosoma como la transcripcion la replicacion y la recombinacion cita requerida La tecnica de Inmunoprecipitacion de cromatina ChIP consta basicamente de dos pasos las celulas in vivo son tratadas con formaldehido para que se fijen las interacciones proteina proteina y las interacciones proteina ADN las celulas son lisadas para fraccionar la cromatina unida a las proteinas seguido de la inmunoprecipitacion de los complejos proteina ADN con anticuerpos especificos para la proteina de interes los fragmentos de ADN se separan de las proteinas mediante acidificacion y se aislan Las secuencias especificas de ADN inmunoprecipitadas son entonces amplificadas por PCR para determinar si han sido o no enriquecidas en las muestras correspondientes para cada anticuerpo 2 1 Vease tambien EditarCHIP seqReferencias Editar a b Voet D Voet J G 2006 cap34 Control de la expresion Bioquimica tercera edicion Medica Panamericana p 1527 Consultado el 22 de febrero de 2020 Kuo M H Allis C D 1999 In vivo cross linking and immunoprecipitation for studying dynamic Protein DNA associations in a chromatin environment Methods 19 3 425 433 Enlaces externos EditarInmunoprecipitacion de cromatina Wikimedia Commons alberga una categoria multimedia sobre Inmunoprecipitacion de cromatina Datos Q901026 Multimedia Chromatin immunoprecipitation Obtenido de https es wikipedia org w index php title Inmunoprecipitacion de cromatina amp oldid 125138309, wikipedia, wiki, leyendo, leer, libro, biblioteca,
