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Tomografía crioelectrónica

La tomografía crioelectrónica o criotomografía es una técnica de microscopía electrónica de transmisión. Pretende aplicar las elevadas prestaciones de estos instrumentos, que actualmente alcanzan la resolución atómica, intentando salvar los problemas que planteaban anteriormente:

  • Preservar las estructuras nativas en condiciones de alto vacío.
  • Obtención de estructuras tridimensionales.
  • Obtención de suficientes imágenes antes de la destrucción de la muestra por los haces electrónicos de alta energía.
Reconstrucción 3D total, mediante Criotomografía de un centríolo.
Rebanada de criotomografía electrónica de células de Bdellovibrio bacteriovorus

Para ello se congelan rápidamente las muestras en condiciones que permiten su vitrificación. Existen dos técnicas de congelación de preparados:

  • Las muestras finas (menos de 0,5 μm se congelan rápidamente en etano líquido. Esta técnica es adecuada para células pequeñas y regiones celulares de poco espesor.
  • Las muestras de mayor espesor se congelan mediante alta presión, y posteriormente se obtienen secciones finas de un espesor entre 50–200 nm con la muestra aún congelada.
Reconstrucción 3D de dilatación presináptica luego de múltiples cortes apilados.

Previamente las muestras se pueden impregnar con oro coloidal. El microscopio se mantiene en condiciones de congelación. Las imágenes tridimensionales se obtienen mediante algoritmos matemáticos de reconstrucción a partir de imágenes de los objetos tomadas desde múltiples direcciones. A este paso se le denomina "tomografía". Su aplicación restringe el límite de resolución de los detalles a unos 2 nm.

El microscopio se emplea en desarrollos farmacológicos, en el estudio del HIV y en la resolución de estructuras como motores moleculares, poros nucleares o mitocondrias.

Véase también

Referencias

  • (en inglés). 2008. Archivado desde el original el 28 de diciembre de 2008. Consultado el 9 de marzo de 2009. 
  • Lučić, Vladan; Andrew Leis y Wolfgang Baumeister (agosto de 2008). «Cryo-electron tomography of cells: connecting structure and function». Histochem Cell Biol. (en inglés) 130 (2): 185-96. PMID 18566823. Consultado el 9 de marzo de 2009. 

Enlaces externos

  • tomviz: Visualización de la tomografía de código abierto y procesamiento de datos
  • Modelo de una mitocondria realizado mediante tomografía crioelectrónica.
  •   Datos: Q904576

tomografía, crioelectrónica, tomografía, crioelectrónica, criotomografía, técnica, microscopía, electrónica, transmisión, pretende, aplicar, elevadas, prestaciones, estos, instrumentos, actualmente, alcanzan, resolución, atómica, intentando, salvar, problemas,. La tomografia crioelectronica o criotomografia es una tecnica de microscopia electronica de transmision Pretende aplicar las elevadas prestaciones de estos instrumentos que actualmente alcanzan la resolucion atomica intentando salvar los problemas que planteaban anteriormente Preservar las estructuras nativas en condiciones de alto vacio Obtencion de estructuras tridimensionales Obtencion de suficientes imagenes antes de la destruccion de la muestra por los haces electronicos de alta energia Reconstruccion 3D total mediante Criotomografia de un centriolo Rebanada de criotomografia electronica de celulas de Bdellovibrio bacteriovorus Para ello se congelan rapidamente las muestras en condiciones que permiten su vitrificacion Existen dos tecnicas de congelacion de preparados Las muestras finas menos de 0 5 mm se congelan rapidamente en etano liquido Esta tecnica es adecuada para celulas pequenas y regiones celulares de poco espesor Las muestras de mayor espesor se congelan mediante alta presion y posteriormente se obtienen secciones finas de un espesor entre 50 200 nm con la muestra aun congelada Reconstruccion 3D de dilatacion presinaptica luego de multiples cortes apilados Previamente las muestras se pueden impregnar con oro coloidal El microscopio se mantiene en condiciones de congelacion Las imagenes tridimensionales se obtienen mediante algoritmos matematicos de reconstruccion a partir de imagenes de los objetos tomadas desde multiples direcciones A este paso se le denomina tomografia Su aplicacion restringe el limite de resolucion de los detalles a unos 2 nm El microscopio se emplea en desarrollos farmacologicos en el estudio del HIV y en la resolucion de estructuras como motores moleculares poros nucleares o mitocondrias Vease tambien EditarMicroscopio electronicoReferencias Editar The Jensen Laboratory What we do Techniques tutorial en ingles 2008 Archivado desde el original el 28 de diciembre de 2008 Consultado el 9 de marzo de 2009 Lucic Vladan Andrew Leis y Wolfgang Baumeister agosto de 2008 Cryo electron tomography of cells connecting structure and function Histochem Cell Biol en ingles 130 2 185 96 PMID 18566823 Consultado el 9 de marzo de 2009 La referencia utiliza el parametro obsoleto coautores ayuda Enlaces externos Editartomviz Visualizacion de la tomografia de codigo abierto y procesamiento de datos Modelo de una mitocondria realizado mediante tomografia crioelectronica Datos Q904576Obtenido de https es wikipedia org w index php title Tomografia crioelectronica amp oldid 126034705, wikipedia, wiki, leyendo, leer, libro, biblioteca,

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