El Hoechst es un colorante fluorescente de ADN empleado en la microscopía de fluorescencia y en la separación celular por citometría de flujo (FACS). Por su capacidad de tinción de ADN, también se emplea para visualizar núcleos y mitocondrias. Se emplean habitualmente dos bisbenzimidazoles muy relacionados: Hoechst 33258 y Hoechst 33342.[1] Ambos colorantes son excitados por luz ultravioleta con una longitud de onda cercana a los 350 nm y emiten fluorescencia azul/cían con un máximo de emisión de alrededor de 461 nm.
Hoechst 33258
Hoechst 33258 (magenta) unido al surco menor del ADN (verde y azul). Imagen de PDB 264D .
El Hoechst puede usarse tanto en células vivas como fijadas, y se emplean a menudo en sustitución de otro tinte de ácidos nucleicos: el DAPI. Se diferencian de éste en el grupo etilo adicional del Hoechst 33342, que le da un comportamiento más lipófilo, por lo que puede atravesar más fácilmente la membrana celular.
Referencias
Hawley, Robert C.; Teresa S. Hawley (2004). Flow Cytometry Protocols (Methods in Molecular Biology (Clifton, N.J.), V. 263.). Totowa, NJ: Humana Press. ISBN1-58829-235-5.
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